原标题：深度总结篇：光遗传学技术在三箱社交行为实验中的测试方法与注意事项

　　小鼠天性对新奇事物有好奇心，研究表明，与熟悉的环境相比，小鼠对不 熟悉的环境有更强探索欲望。本实验是在一个(20+8+20) *20cm的位置偏好箱 中完成的，包含左侧箱、右侧箱和中间箱(自由运动时小鼠从中间箱放入，避 免人为控制的左右箱进入顺序对实验结果造成影响)。自由探索实验(free exploring)以及后面将要提到的实时位置偏好实验均是用这种三箱装置完成， 每套三箱设使用不同的花纹的壁纸以及不同纹路地板作为不同环境。所用到 的壁纸有四种图案，A.黑白星形格B.斜黑白条纹C.黑白方格D.竖直黑白 条纹,本文所用到的地板有两张，地板1.左侧平板，右侧浅斜条纹；地板2.左 侧空心圆格，右侧空心条纹，将环境与地板配对使用。

　　环境自由探索实验旨在评价小鼠的探索行为，研究目标脑区及环路在探索 行为中所起的作用。自由探索实验中，所用到环境为A.黑白星形格+B.斜黑白 条纹壁纸和地板1左侧平板，右侧浅斜条纹，每次实验前均需测试小鼠对三箱 环境偏好的基础值，即baseline测定。

　　本文采用的自由探索行为实验(free exploring)包括连续三天的测试。

　　天为基线baseline检测，每只小鼠放入中央箱之后开始自由探索，每 只小鼠探索时间为20min,软件将自动记录小鼠运动轨迹、平均速度以及在各 箱所停留的时间进入次数等参数，将其记为baselineo

　　第二天为training阶段，用中间隔板将小鼠限制于某一侧环境，让其在指 定的20*20cm单侧箱内自由探索，并同时给予473nm LED光照，刺激参数 BLA/NAC均为20Hz, 15ms,光纤末端光强10mw左右。(为避免激光损输出 伤，刺激模式为3s-on-3s-off不断循环，直到20min测试时间束。)

　　第三天为test阶段，位置偏好箱两侧均正常开放，将小鼠置于中央箱，令 其自由探索20min,并利用软件系统自动记录小鼠运动轨迹、平均速度以及在 各箱所停留的时间、进入次数等参数，将其记为Test。

　　(环境探索实验使用的三箱环境为A.黑白星形格+ B.斜黑白条纹壁纸和地 板1左侧平板，右侧浅斜条纹。由于第二天training阶段在指定封闭环境中给 光刺激20min,在第三天test时，与非刺激环境相比，该光刺激环境对于小鼠 而言是熟悉的环境(familiar),因此由于对不熟悉环境的探索天性，小鼠在 test阶段理论上将对非光照的不熟悉环境表现出更强的偏好性。

　　(III).每只小鼠实验结束后，应用75%酒精彻底清洁实验箱，避免小鼠行为结果 受到上一只小鼠的气味影响。
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